毛细管等电聚焦电泳（毛细管等电聚焦电泳检测）

icief和cief的区别

icief和cief的区别为：性质不同、依据不同、通道不同。

一、性质不同

1、icief：icief是成像毛细管等电聚焦电泳。

2、cief：cief是毛细管等电聚焦电泳。

二、依据不同

1、icief：icief基于不同的蛋白质分子在电场中的迁移速率不同。

2、cief：cief依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离。

三、通道不同

1、icief：icief利用玻璃、石英或各种聚合物材料加工微米级通道。

2、cief：cief是以弹性石英毛细管为分离通道。

毛细管电泳法的特点;优点

1、电泳柱效更高，可达105m-1～106m-1，分离速度更快，在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。

2、溶剂和试样消耗极少，试样用量仅为纳升级。

3、没有高压泵输液，因此仪器成本更低。

4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分，毛细管电泳有很大的选择性，可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。

毛细管电泳法使用注意事项

对于实验结果的可靠性和重现性，毛细管的冲洗起到了至关重要的作用，每一次冲洗都必须认真地完成，冲洗时间不允许缩短或者不冲洗。

将实验做完以后一定要使用水对毛细管进行冲洗，不然毛细管可能会被堵塞,使得实验结果受到严重地影响，希望引起足够的重视。

在对毛细管进行冲洗的时候，不要将电压加在毛细管上，讲义上给定的工作电压不允许更改，也不建议对进样时间加以改变。

以上内容参考  百度百科-毛细管电泳法

毛细管电泳法的毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳（Capillary

Zone

Electrophoresis，

CZE）最常见的模式，用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳（Capillary

Gel

Electrophoresis，CGE）毛细管凝胶电泳，在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质，如葡聚糖、聚环氧乙烷，装入毛细管中进行分析，称毛细管无胶筛分电泳，故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶和无胶筛分两类。胶束电动毛细管色谱（Micellar

Electrokinetic

Capillary

Electrophoresis，MECE）胶束电动毛细管色谱，在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基***钠，形成胶束，被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移，达到分离。本模式能用于中性物质的分离。亲和毛细管电泳

（Affinity

Capillary

Electrophoresis，

ACE）亲和毛细管电泳，在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基，以亲和力的不同达到分离目的。毛细管电色谱

（Capillary

Electrochromatography，

CEC）毛细管电色谱，是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程，此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。毛细管等电聚焦电泳（Capillary

Isoelectric

Focusing，CIEF）毛细管等电聚焦电泳，是通过内壁涂层使电渗流减到最小，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别为酸和碱，加高电压后，在毛细管内建立了pH梯度，溶质在毛细管中迁移至各自的等电点，形成明显区带，聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。毛细管等速电泳（Capillary

Isotachophoresis，

CITP）毛细管等速电泳，采用先导电解质和后继电解质，使溶质按其电泳倘度不同得以分离。

以上各模式以CZE、CGE、MECE三种应用较多。

常见的电泳***

实验室中常见的电泳***有以下几种：

一、纸电泳

指用滤纸作为支持载体的电泳***。是最早使用的区带电泳。

将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封罩，即可由电泳电源输入直流电压（100V～1000V）进行电泳。

二、醋酸纤维素薄膜电泳

电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。

三、凝胶电泳

由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物进行电泳的方式。

凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是普通电泳中应用最多的两种形式。

目前，这种办法被广泛用来分析蛋白质和核酸。

四、等电聚焦电泳

1．等电聚焦电泳过程

一种利用有pH值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。

在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液（两性载体电解质）中进行分离，每一种被分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的pH位置，在那里不再移动（称为聚焦）。

2．等电聚焦电泳的特点

使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、连续、线性的pH梯度；

由于“聚焦效应”，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；

电泳速度快;分辨率高;

加入样品的位置可任意选择；

可用于测定蛋白质类物质的等电点;

适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分离分析。

五、等速电泳

采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动，实现分离。

六、双向凝胶电泳（二维电泳）

第一向采用等电聚焦根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。

第二向采用了十二烷基***钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。

七、免疫电泳

免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种***的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开；然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。

您好，请教您一个问题！

当然是可以的，但是精确度却不会很高，这是所有电泳实验共同的瓶颈。一般电泳后的分离成分不是用收集的***鉴定的，因为大分子物质都是微量的，不能以宏观的角度来研究。不过按照现在的技术水平应该还是可以做到的。

以下是一些资料

毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析***。设备的主要部件有0～30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50～75μm)、长度一般为30～100cm的弹性石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外／可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，前者最为常用。进样***有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等

部件。

毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH值＞3的情况下，其内表面带负电，与缓冲液接触时形成双电层，在高压电场作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动，从而形成电渗流。同时，在缓冲溶液中，带电粒子在电场作用下，以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。

目前，毛细管电泳的分离模式有以下几种。

(1)毛细管区带电泳，用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁涂层。

(2)毛细管凝胶电泳，在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质，如葡聚糖、聚环氧乙烷，装人毛细管中进行分析，称毛细管无胶筛分电泳，故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶和无胶筛分两类。

(3)胶束电动毛细管色谱，在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基***钠，形成胶束，被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移，达到分离。本模式能用于中性物质的分离。

(4)亲和毛细管电泳，在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基，以亲和力的不同达到分离目的。

(5)毛细管电色谱，是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程，此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。

(6)毛细管等电聚焦电泳，是通过内壁涂层使电渗流减到最小，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别为酸和碱，加高电压后，在毛细管内建立了pH梯度，溶质在毛细管中迁移至各自的等电点，形成明显区带，聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。

(7)毛细管等速电泳，采用先导电解质和后继电解质，使溶质按其电泳倘度不同得以分离。

以上各模式以(1)、(2)、(3)种应用较多。

电极槽和毛细管内的溶液为缓冲液，可以加入有机溶剂作为改性剂，以及加入表面活性剂，称作运行缓冲液。运行缓冲液使用前应脱气。电泳谱中各成分的出峰时间称迁移时间。胶束电动毛细管色谱中的胶束相当于液相色谱的固定相，但它在毛细管内随电渗流迁移，故容量因子为无穷大的成分最终也随胶束流出。其他各种参数都与液相色谱所用的相同。

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